低分化鼻咽癌細(xì)胞
低分化鼻咽癌細(xì)胞,是源自人鼻咽部低分化腺癌或鱗癌組織、經(jīng)體外長期培養(yǎng)建系的穩(wěn)定腫瘤細(xì)胞株,核心特性是分化程度低、惡性程度高、增殖速度快、侵襲轉(zhuǎn)移潛能強(qiáng),無支原體、細(xì)菌、真菌及病毒污染,經(jīng)多次傳代驗證,可長期穩(wěn)定培養(yǎng)。該細(xì)胞系保留鼻咽癌細(xì)胞的核心病理生理特征,同時具備低分化腫瘤細(xì)胞的典型表型,能模擬體內(nèi)低分化鼻咽癌的生長、增殖、侵襲及耐藥相關(guān)特性,是鼻咽癌發(fā)病機(jī)制、低分化調(diào)控、抗腫瘤藥物篩選、預(yù)后評估及臨床診療相關(guān)研究的核心工具,廣泛應(yīng)用于臨床醫(yī)學(xué)、腫瘤學(xué)、藥理學(xué)等科研領(lǐng)域,為低分化鼻咽癌基礎(chǔ)研究、藥物研發(fā)及臨床轉(zhuǎn)化提供標(biāo)準(zhǔn)化、高活性的細(xì)胞模型。
細(xì)胞特性
該細(xì)胞具有明確的低分化腫瘤細(xì)胞特性及穩(wěn)定生長特征,核心特性如下:細(xì)胞形態(tài)典型,呈不規(guī)則多邊形或梭形,多為貼壁生長,部分亞型為半貼壁生長,胞體大小不均、折光性中等,排列紊亂,無明顯極性,符合低分化腫瘤細(xì)胞“形態(tài)異型性高、結(jié)構(gòu)紊亂"的典型形態(tài)特征;細(xì)胞特異性表達(dá)鼻咽癌相關(guān)標(biāo)志物(如CK5/6、p63、EB病毒相關(guān)抗原等),經(jīng)免疫熒光、免疫印跡等方法驗證,標(biāo)志物表達(dá)穩(wěn)定,可特異性區(qū)分于正常鼻咽上皮細(xì)胞及其他部位腫瘤細(xì)胞;細(xì)胞純度≥95%,無雜細(xì)胞污染,無支原體、細(xì)菌、真菌及病毒污染,細(xì)胞活性≥90%,可穩(wěn)定傳代≥50代,傳代過程中低分化表型、增殖能力、侵襲潛能及標(biāo)志物表達(dá)無明顯衰退;細(xì)胞增殖速度快,倍增時間短,培養(yǎng)過程中無需額外誘導(dǎo)即可維持低分化腫瘤細(xì)胞表型,可穩(wěn)定分泌鼻咽癌相關(guān)蛋白及促侵襲、促轉(zhuǎn)移因子;細(xì)胞為貼壁或半貼壁依賴性生長,適配常規(guī)腫瘤細(xì)胞培養(yǎng)體系,無需特殊包被基質(zhì),培養(yǎng)過程中可穩(wěn)定維持細(xì)胞表型與腫瘤相關(guān)功能,符合該細(xì)胞的核心生長特性。
產(chǎn)品特點
本產(chǎn)品具有活性高、純度高、特異性強(qiáng)、穩(wěn)定性好、適用性廣、操作便捷等核心特點,同時兼具低分化腫瘤細(xì)胞的獨(dú)特優(yōu)勢。細(xì)胞經(jīng)嚴(yán)格分離純化、傳代篩選及多指標(biāo)質(zhì)檢,純度≥95%,活性≥90%,細(xì)胞形態(tài)完整、增殖能力強(qiáng),可直接用于實驗,無需額外純化或誘導(dǎo),降低實驗門檻;細(xì)胞特異性ji強(qiáng),精準(zhǔn)表達(dá)鼻咽癌相關(guān)標(biāo)志物,保留該細(xì)胞的病理生理特征,惡性程度高、侵襲轉(zhuǎn)移潛能強(qiáng),可有效模擬體內(nèi)低分化鼻咽癌的生長及轉(zhuǎn)移狀態(tài),保障實驗的特異性與準(zhǔn)確性,契合低分化鼻咽癌研究的核心需求;細(xì)胞生理功能穩(wěn)定,可長期傳代培養(yǎng),低分化表型、增殖能力、侵襲潛能及標(biāo)志物表達(dá)保持穩(wěn)定,能穩(wěn)定提供高活性低分化腫瘤細(xì)胞模型,保障實驗數(shù)據(jù)的重復(fù)性與可靠性;適配常規(guī)腫瘤細(xì)胞培養(yǎng)體系,培養(yǎng)條件溫和,操作流程簡潔,無需復(fù)雜實驗設(shè)備,適配各類生物實驗室及腫瘤研究機(jī)構(gòu)使用;細(xì)胞無支原體、細(xì)菌、真菌污染,質(zhì)檢嚴(yán)格,可直接用于后續(xù)腫瘤機(jī)制研究、藥物篩選、標(biāo)志物檢測、侵襲轉(zhuǎn)移實驗等各類實驗,減少實驗污染風(fēng)險,保障實驗順利進(jìn)行;適用范圍覆蓋腫瘤學(xué)、藥理學(xué)、免疫學(xué)、臨床醫(yī)學(xué)等多個領(lǐng)域,可滿足低分化鼻咽癌發(fā)病機(jī)制、分化調(diào)控、耐藥機(jī)制、侵襲轉(zhuǎn)移、抗腫瘤藥物篩選及療效評價等多種科研場景需求,同時可用于與免疫細(xì)胞共培養(yǎng),評估腫瘤免疫應(yīng)答及免yi治療效果,契合腫瘤研究的多元化需求。
適用范圍與樣本(細(xì)胞)處理
本產(chǎn)品適用于低分化鼻咽癌發(fā)病機(jī)制研究、分化調(diào)控機(jī)制研究、抗腫瘤藥物篩選及療效評價、鼻咽癌相關(guān)標(biāo)志物檢測、腫瘤侵襲轉(zhuǎn)移及耐藥機(jī)制研究、腫瘤免疫研究等場景;可用于大規(guī)模培養(yǎng)獲取細(xì)胞及細(xì)胞上清,用于鼻咽癌相關(guān)蛋白、細(xì)胞因子的檢測與純化;可用于免疫熒光、免疫印跡、ELISA、Transwell、劃痕實驗、克隆形成實驗等多種實驗技術(shù),檢測鼻咽癌標(biāo)志物表達(dá)、評估細(xì)胞增殖、侵襲轉(zhuǎn)移能力、克隆形成能力、篩選抗腫瘤藥物;可用于體外構(gòu)建低分化鼻咽癌模型,探究鼻咽癌發(fā)生、發(fā)展、低分化調(diào)控及侵襲轉(zhuǎn)移的分子機(jī)制,為鼻咽癌臨床診療及藥物研發(fā)提供理論支撐;可作為工具細(xì)胞,用于抗腫瘤藥物的篩選、藥效評價、作用機(jī)制分析,輔助藥物研發(fā)與質(zhì)量控制,符合腫瘤藥物研發(fā)的規(guī)范要求。(具體培養(yǎng)步驟、細(xì)胞維護(hù)、實驗應(yīng)用細(xì)節(jié)請參考產(chǎn)品說明書)
細(xì)胞處理與培養(yǎng)需嚴(yán)格遵循無菌操作規(guī)范,避免細(xì)胞污染;收到細(xì)胞后,立即置于37℃水浴鍋中快速解凍(1-2分鐘,嚴(yán)禁反復(fù)凍融),解凍后立即加入預(yù)熱至37℃的培養(yǎng)基(腫瘤細(xì)胞專用基礎(chǔ)培養(yǎng)基 + 10% 胎牛血清 + 專用生長添加劑)中,輕輕吹打混勻(動作輕柔,避免損傷細(xì)胞),4℃、300×g 離心5分鐘,棄上清液,用培養(yǎng)基重懸細(xì)胞后,接種至培養(yǎng)瓶中,置于37℃、5% CO?、飽和濕度培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng);培養(yǎng)24小時后更換新鮮培養(yǎng)基,去除未貼壁的死細(xì)胞及細(xì)胞碎片,后續(xù)每2-3天更換一次培養(yǎng)液;細(xì)胞密度達(dá)到0.8–1.0×10? cells/mL時進(jìn)行傳代(適配低分化細(xì)胞快速增殖的特點),傳代比例為1:3–1:4,傳代時輕輕吹打瓶底使貼壁細(xì)胞脫落,離心后重懸接種,傳代過程中可采用溫和的細(xì)胞分離方式,避免損傷細(xì)胞;該細(xì)胞可長期傳代培養(yǎng),傳代過程中需維持對數(shù)生長期,確保低分化表型、增殖能力及侵襲潛能穩(wěn)定;如需收集細(xì)胞或上清,可在細(xì)胞狀態(tài)良好時,用PBS漂洗后處理或直接收集培養(yǎng)上清,適配各類實驗需求。
儲存與注意事項
儲存條件
細(xì)胞凍存液(含10% DMSO、20% 胎牛血清及70% 腫瘤細(xì)胞專用基礎(chǔ)培養(yǎng)基)需采用程序化降溫方式,置于-80℃密封保存,長期儲存(超過6個月)建議轉(zhuǎn)移至液氮(-196℃)中保存,嚴(yán)禁反復(fù)凍融、劇烈震蕩,防止細(xì)胞破裂、活性喪失及低分化表型改變;凍存細(xì)胞取出后需快速解凍,避免在-20℃~0℃區(qū)間停留過久,防止細(xì)胞損傷;未接種的凍存細(xì)胞需密封保存,做好標(biāo)記(細(xì)胞名稱、凍存日期、批次),避免混淆;培養(yǎng)基需置于2~8℃避光密封保存,避免反復(fù)凍融,使用前預(yù)熱至37℃,未用完的培養(yǎng)液需密封存放,建議1周內(nèi)用完;培養(yǎng)相關(guān)試劑(DMSO、Protein G/A層析介質(zhì)、包被試劑等)需按對應(yīng)要求儲存,確保試劑活性,實驗相關(guān)試劑需按需冷藏或冷凍保存,符合生物制品儲存的規(guī)范要求。
注意事項
1. 所有細(xì)胞操作需嚴(yán)格遵循無菌規(guī)范,實驗器具需提前高壓滅菌處理,接種、換液、傳代時更換吸嘴,避免交叉污染,影響細(xì)胞活性及低分化表型;細(xì)胞培養(yǎng)過程中需保持培養(yǎng)環(huán)境穩(wěn)定,避免溫度、CO?濃度波動,防止細(xì)胞脫壁或活性下降,同時避免劇烈震蕩,防止細(xì)胞損傷,契合細(xì)胞培養(yǎng)的無菌操作與環(huán)境控制要求。
2. 細(xì)胞解凍、接種、傳代需嚴(yán)格遵循操作規(guī)范,避免反復(fù)凍融,否則會導(dǎo)致細(xì)胞破裂、活性喪失,影響培養(yǎng)效果及低分化表型;解凍時需快速均勻,接種后及時置于培養(yǎng)箱中,避免細(xì)胞長時間暴露在室溫下;操作過程中動作輕柔,避免吹打過度,防止損傷細(xì)胞,影響增殖及腫瘤相關(guān)功能,保障細(xì)胞活性與低分化表型穩(wěn)定,避免因操作不當(dāng)導(dǎo)致細(xì)胞分化狀態(tài)改變。
3. 細(xì)胞培養(yǎng)過程中需定期觀察細(xì)胞狀態(tài),若出現(xiàn)細(xì)胞貼壁不良、脫壁、形態(tài)異常(胞體皺縮、折光性差、排列異常紊亂)或污染(培養(yǎng)液渾濁、出現(xiàn)絮狀物)等情況,需及時處理;培養(yǎng)基需定期更換,避免營養(yǎng)耗盡及代謝廢物積累,同時可根據(jù)細(xì)胞生長狀態(tài)調(diào)整傳代比例(適配低分化細(xì)胞快速增殖特點),確保細(xì)胞處于對數(shù)生長期,維持低分化表型穩(wěn)定,契合該細(xì)胞的培養(yǎng)維護(hù)要點。
4. 實驗操作需嚴(yán)格遵循實驗室安全規(guī)范,妥善處理廢棄細(xì)胞、培養(yǎng)液及耗材,操作含DMSO的凍存液時需做好個人防護(hù)措施(佩戴手套、口罩、護(hù)目鏡),避免皮膚接觸和吸入;避免細(xì)胞接觸強(qiáng)氧化劑、重金屬離子及蛋白變性物質(zhì),防止干擾細(xì)胞活性及低分化表型;培養(yǎng)期間可采用無菌檢測手段定期監(jiān)測細(xì)胞無菌狀態(tài),確保細(xì)胞質(zhì)量符合實驗及應(yīng)用要求,契合生物實驗室安全與質(zhì)量控制規(guī)范。
訂購信息
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