NR8383大鼠肺泡巨噬細胞系
NR8383大鼠肺泡巨噬細胞系在肺部疾病研究領(lǐng)域應(yīng)用廣泛,憑借其保留的肺泡巨噬細胞核心功能,成為探究肺部炎癥反應(yīng)、感染機制及免疫調(diào)節(jié)的重要實驗?zāi)P停瑸楹粑到y(tǒng)相關(guān)研究提供了可靠的細胞工具。
細胞特性與來源背景:該細胞系源于大鼠肺泡巨噬細胞,經(jīng)原代培養(yǎng)和永生化處理建立。細胞形態(tài)呈圓形或不規(guī)則形,胞質(zhì)豐富,可見大量吞噬顆粒,細胞核呈腎形或分葉狀,位于細胞一側(cè),核仁不明顯。生長方式以貼壁生長為主,部分細胞輕微懸浮,傳代后 24 小時貼壁率約 92%。核心參數(shù)表現(xiàn)穩(wěn)定:倍增時間約 48 小時,連續(xù)傳代 50 次后仍保持穩(wěn)定的生物學(xué)特性;巨噬細胞特異性標(biāo)志物如 CD68、F4/80 等表達陽性,經(jīng)流式細胞術(shù)檢測陽性率達 94%,細胞純度達 95% 以上;無細菌、真菌、支原體及病毒污染,保障實驗結(jié)果的準(zhǔn)確性。
科研應(yīng)用價值:在肺部炎癥機制研究中,NR8383 細胞受脂多糖(LPS)刺激后,會大量分泌腫瘤壞死因子 -α(TNF-α)和白細胞介素 - 6(IL-6),24 小時分泌量分別達 320pg/ml 和 280pg/ml,可模擬肺部感染時的炎癥反應(yīng),為解析炎癥信號通路提供理想模型。在抗感染研究方面,該細胞對肺炎鏈球菌、流感病毒等病原體具有吞噬能力,吞噬率分別達 65% 和 58%,能很好地模擬肺泡巨噬細胞的抗感染過程,助力抗感染藥物的篩選。此外,在肺纖維化研究中,轉(zhuǎn)化生長因子 -β1(TGF-β1)可誘導(dǎo)該細胞向促纖維化表型轉(zhuǎn)化,α- 平滑肌肌動蛋白(α-SMA)表達量增加 2.3 倍,可用于探究巨噬細胞在肺纖維化中的作用機制。
科研應(yīng)用價值:在肺部炎癥機制研究中,NR8383 細胞受脂多糖(LPS)刺激后,會大量分泌腫瘤壞死因子 -α(TNF-α)和白細胞介素 - 6(IL-6),24 小時分泌量分別達 320pg/ml 和 280pg/ml,可模擬肺部感染時的炎癥反應(yīng),為解析炎癥信號通路提供理想模型。在抗感染研究方面,該細胞對肺炎鏈球菌、流感病毒等病原體具有吞噬能力,吞噬率分別達 65% 和 58%,能很好地模擬肺泡巨噬細胞的抗感染過程,助力抗感染藥物的篩選。此外,在肺纖維化研究中,轉(zhuǎn)化生長因子 -β1(TGF-β1)可誘導(dǎo)該細胞向促纖維化表型轉(zhuǎn)化,α- 平滑肌肌動蛋白(α-SMA)表達量增加 2.3 倍,可用于探究巨噬細胞在肺纖維化中的作用機制。
培養(yǎng)與保存規(guī)范:推薦使用含 10% 胎牛血清的 F-12K 培養(yǎng)基,添加 1% 抗生素混合液預(yù)防污染,培養(yǎng)環(huán)境為 37℃、5% CO?飽和濕度的恒溫培養(yǎng)箱。培養(yǎng)基應(yīng)每 2 天更換一次,確保營養(yǎng)充足。傳代時,先吸去舊培養(yǎng)基,用 PBS 清洗細胞 2 次,加入溫和的消化液,37℃孵育 5-8 分鐘,待細胞松動后,加入含血清的培養(yǎng)基終止消化,輕輕吹打制成細胞懸液,按 1:2-1:3 的比例接種到新的培養(yǎng)瓶中,每 4-5 天傳代一次,維持細胞融合度在 70%-80% 之間。凍存時,選用含 20% 胎牛血清和 10% DMSO 的 F-12K 培養(yǎng)基作為凍存液,將細胞濃度調(diào)整為 1×10?-5×10?個 /ml,分裝到凍存管后,經(jīng)程序降溫盒梯度降溫至 - 80℃,次日轉(zhuǎn)入液氮長期保存。復(fù)蘇時,將凍存管從液氮中取出,迅速放入 37℃水浴中融化,離心去除凍存液后,接種到含新鮮培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中,24 小時后更換培養(yǎng)基。
NR8383 大鼠肺泡巨噬細胞系以其穩(wěn)定的生物學(xué)特性、明確的功能特征及易于培養(yǎng)的優(yōu)勢,在肺部疾病基礎(chǔ)研究和藥物研發(fā)中發(fā)揮著重要作用,為推動呼吸系統(tǒng)領(lǐng)域研究的發(fā)展提供了有力支持。
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