大黃魚EPC細胞

檢測原理

產(chǎn)品特點

• 純度高：細胞純度≥95%，經(jīng)形態(tài)學鑒定、免疫組化染色及微生物檢測（細菌、真菌、支原體、魚類病毒），均無雜細胞及微生物污染，可直接用于實驗，能有效保證實驗結果的準確性和重復性，契合水產(chǎn)科研及細胞培養(yǎng)肉研發(fā)的嚴格要求；

• 生物學特性穩(wěn)定：細胞增殖能力強，可連續(xù)傳代培養(yǎng)，傳代過程中形態(tài)及生理功能無明顯退變，實驗重復性強，可穩(wěn)定表達上皮細胞特異性標志物，增殖與分化潛能穩(wěn)定，經(jīng)多次傳代后仍能保持良好的細胞活性，符合長期科研及規(guī)?；囵B(yǎng)的需求，部分細胞可實現(xiàn)高密度增殖，細胞密度可達6×10?cell/mL以上；

• 功能完整性：保留該細胞的核心功能，具有良好的貼壁生長能力和分化潛能，可響應相關信號通路誘導，向肌肉細胞等方向分化，能支持大黃魚腫大細胞病毒等水產(chǎn)病毒的增殖，可用于細胞培養(yǎng)魚肉的規(guī)?；苽?，真實模擬大黃魚體內(nèi)細胞的生理特性，實驗結果具有良好的應用相關性；

• 操作便捷：采用魚類細胞專用標準化培養(yǎng)體系，解凍后可快速復蘇（復蘇存活率≥85%），培養(yǎng)條件溫和（常規(guī)25-28℃、5% CO?培養(yǎng)），無需特殊試劑及復雜操作，可適配可食性大孔微載體培養(yǎng)，適合常規(guī)實驗室培養(yǎng)與操作，同時可滿足規(guī)?；囵B(yǎng)需求，降低實驗及研發(fā)門檻，可參考標準化魚類細胞培養(yǎng)流程進行復蘇、傳代及分化誘導操作；

• 適用性廣：可用于多種科研及產(chǎn)業(yè)研發(fā)場景，包括大黃魚細胞培養(yǎng)肉制備、肌肉細胞分化機制研究、水產(chǎn)病毒分離與鑒定、水產(chǎn)病害防控藥物篩選、基因功能驗證及細胞培養(yǎng)技術優(yōu)化等，滿足不同科研及產(chǎn)業(yè)需求，同時可用于可食性微載體培養(yǎng)實驗、細胞三維培養(yǎng)優(yōu)化等場景，為大黃魚相關科研及細胞農(nóng)業(yè)產(chǎn)業(yè)發(fā)展提供可靠的細胞模型。

適用樣本類型

• 細胞生物學實驗：包括細胞增殖、凋亡、分化及傳代規(guī)律等基礎實驗，用于研究其生物學行為及分化特性，可開展細胞培養(yǎng)條件優(yōu)化、分化誘導調控、微載體培養(yǎng)適配性等相關實驗，同時可用于細胞增殖放大技術研究，為規(guī)?；囵B(yǎng)提供支撐；

• 細胞培養(yǎng)肉研發(fā)：用于大黃魚細胞培養(yǎng)肉的規(guī)?；苽?，可作為肌肉細胞、脂肪細胞的增殖載體，通過調控信號通路誘導細胞分化，結合可食性微載體及3D打印技術，構建類似天然大黃魚肌肉組織的仿真魚排，契合細胞農(nóng)業(yè)產(chǎn)業(yè)研發(fā)需求；

• 分子生物學實驗：用于魚類細胞相關基因、蛋白表達檢測，如RT-PCR、Western blot、免疫組化等實驗，探究大黃魚細胞增殖、分化及病毒感染的分子機制，為水產(chǎn)病害防控及細胞培養(yǎng)技術優(yōu)化提供新思路，同時可用于病毒基因組及蛋白質組研究；

• 水產(chǎn)病害與藥物研發(fā)：用于大黃魚腫大細胞病毒等水產(chǎn)病毒的分離、鑒定及增殖，可作為水產(chǎn)抗病du藥物的體外篩選模型，檢測藥物對病毒增殖及細胞損傷的抑制作用，為水產(chǎn)病害防控提供技術支撐，同時可用于水產(chǎn)養(yǎng)殖相關藥物的安全性評估；

• 其他：可用于魚類細胞共培養(yǎng)、細胞三維培養(yǎng)體系構建、可食性微載體適配性驗證等科研場景，具體應用可結合實驗需求調整，同時可用于驗證新型培養(yǎng)技術對細胞增殖及分化能力的影響，建議控制細胞傳代次數(shù)，避免傳代過多導致分化潛能下降，可參考低血清培養(yǎng)基配方控制培養(yǎng)成本。

儲存與注意事項

（一）儲存條件

• 凍存細胞：置于-196℃液氮中長期儲存，優(yōu)先選擇處于對數(shù)生長期、活性穩(wěn)定的細胞進行凍存，凍存時需使用魚類細胞專用凍存液（含20%FBS、10%DMSO、5%魚類細胞生長因子），儲存時需確保液氮液位穩(wěn)定，避免細胞反復凍融（凍融次數(shù)≤3次），否則會導致細胞活性下降、分化潛能降低或死亡，凍存后可在半年后復蘇檢測細胞存活率，確保細胞狀態(tài)良好，凍存細胞不宜長期存儲在-80℃環(huán)境中，應盡快轉移至液氮罐中；

• 復蘇后細胞：復蘇后的細胞需立即放入28℃水浴鍋中快速晃動融化（時間控制在1分鐘內(nèi)），以800-1000r/min的速度離心5分鐘，去除凍存液中的DMSO后，接種至含該細胞專用wan全培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中，置于25-28℃、5% CO?、飽和濕度的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，24-48小時后更換培養(yǎng)基，去除死細胞及未貼壁細胞，新復蘇細胞24小時內(nèi)避免頻繁觀察和更換培養(yǎng)基，防止影響細胞貼壁及增殖，將培養(yǎng)瓶放入培養(yǎng)箱時，可輕輕旋松瓶蓋以保證氣體充分交換（若使用透氣性瓶蓋則無需旋松）；

• 培養(yǎng)基儲存：配套該細胞專用wan全培養(yǎng)基需置于4℃冷藏儲存，避免高溫、強光直射，儲存期限不超過1個月，使用前需恢復至室溫并輕輕搖勻，解凍血清時需逐步解凍，避免快速變溫，防止產(chǎn)生血清沉淀物，血清中出現(xiàn)的纖維蛋白、磷酸鈣等沉淀物不影響細胞生長，可通過離心去除，可根據(jù)實驗需求選用低血清培養(yǎng)基，降低培養(yǎng)成本，培養(yǎng)基中需添加新鮮魚類細胞生長因子，現(xiàn)配現(xiàn)用，避免生長因子失活；

• 運輸條件：細胞運輸采用干冰低溫運輸（-80℃），運輸過程中需做好防震、防潮措施，避免溫度波動，運輸時間不超過72小時，接收后立即放入對應儲存環(huán)境，若無法立即儲存，可在干冰上暫時保存，避免常溫放置過久，運輸過程中需做好細胞標識，防止混淆，運輸前可適當調整細胞密度，確保復蘇后存活率。

（二）注意事項

• 本產(chǎn)品僅用于科研及水產(chǎn)、細胞農(nóng)業(yè)相關產(chǎn)業(yè)研發(fā)，嚴禁用于臨床診斷、治療或其他非科研用途，嚴禁直接接觸人體或用于人體相關實驗，實驗過程中需嚴格遵循動物實驗相關倫理要求，未預約者不得進行細胞實驗；

• 細胞復蘇、培養(yǎng)、傳代需嚴格遵循無菌操作原則，實驗環(huán)境需符合細胞培養(yǎng)要求，實驗器具需經(jīng)紫外燈照射30分鐘和通風30分鐘后使用，操作前需用75%酒精對器具進行消毒，避免微生物污染；該細胞為貼壁生長細胞，傳代時可采用溫和消化方式，避免過度消化損傷細胞，傳代比例建議為1:3-1:5，確保細胞增殖空間，傳代過程中需避免細胞聚團過多，若用于微載體培養(yǎng)，需控制微載體孔徑及細胞接種密度；

• 細胞培養(yǎng)過程中，需定期觀察細胞形態(tài)、生長狀態(tài)及增殖情況，若培養(yǎng)基出現(xiàn)異常顏色，多為CO?溢出或細胞代謝異常導致，可輕輕旋松瓶蓋放入培養(yǎng)箱校正，異常顏色培養(yǎng)基可根據(jù)細胞狀態(tài)判斷是否繼續(xù)使用；若培養(yǎng)液變黃或變濁，可能是細胞密度過高或細菌污染，需及時傳代或丟棄處理；若發(fā)現(xiàn)真菌或霉菌污染，需用紫外燈照射培養(yǎng)箱去除孢子，并進行消毒；培養(yǎng)過程中避免劇烈晃動培養(yǎng)瓶，防止細胞脫落影響生長，若進行三維培養(yǎng)，需控制培養(yǎng)環(huán)境的通氣量；

• 處理細胞支原體污染時，建議優(yōu)先更換新的細胞株，若細胞珍貴，可嘗試使用支原體清除試劑進行治療，支原體污染易復發(fā)，需做好后續(xù)監(jiān)測，支原體污染會影響細胞增殖、分化及病毒支持能力，需嚴格控制；

• 細胞換液時機可根據(jù)細胞狀態(tài)調整，復蘇后隔天更換一次培養(yǎng)基，后續(xù)每2-3天更換一次，換液時動作輕柔，緩慢加入培養(yǎng)基，避免沖擊細胞，換液量為培養(yǎng)基總量的1/2-2/3，避免wan全更換培養(yǎng)基導致營養(yǎng)成分驟變，影響細胞增殖及分化，換液時可收集上清液用于細胞代謝產(chǎn)物或病毒滴度檢測；

• 凍存細胞時，需將細胞懸液以800-1000r/min離心3-5分鐘，丟棄上清液后用預冷的魚類細胞專用凍存液重懸細胞，細胞密度控制在1×10?~1×10?個/ml，分裝后標記細胞種類、凍存時間及操作人員，放入程序降溫盒置于-80℃過夜后，再轉移至液氮中長期儲存，建立細胞凍存臺賬，便于追溯，凍存前可檢測細胞活性，確保凍存細胞功能穩(wěn)定；

• 取出液氮罐中的細胞時，務必加強個人防護，避免凍傷；取材及細胞操作時動作要輕，避免牽拉和擠壓造成細胞機械損傷，切忌用水直接沖洗細胞，可用0.1M PBS輕輕沖洗，避免影響細胞活性及分化潛能；

• 實驗過程中產(chǎn)生的細胞廢液、廢棄培養(yǎng)基及用過的培養(yǎng)耗材，需經(jīng)滅菌處理后再丟棄，避免生物污染；操作人員需穿戴無菌手套、口罩、實驗服，做好個人防護，實驗結束后及時消毒實驗臺面，實驗廢棄物需按生物安全規(guī)范處理，病毒感染及細胞培養(yǎng)肉研發(fā)相關廢液需單獨收集處理，避免交叉污染。

訂購信息

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