粉紋夜蛾細(xì)胞
粉紋夜蛾細(xì)胞是采用標(biāo)準(zhǔn)化酶聯(lián)免疫吸附技術(shù)研發(fā)的科研用檢測試劑盒,可精準(zhǔn)檢測生物樣本中相關(guān)靶標(biāo)濃度,廣泛應(yīng)用于相關(guān)功能研究、桿狀病毒表達(dá)系統(tǒng)優(yōu)化、重組蛋白表達(dá)檢測、昆蟲細(xì)胞培養(yǎng)機(jī)制探究、抗病du藥物篩選及相關(guān)生命科學(xué)基礎(chǔ)研究場景。這類昆蟲細(xì)胞是來源于鱗翅目粉紋夜蛾的常用真核細(xì)胞(常用商品化High Five™細(xì)胞,即BTI-Tn5B1-4細(xì)胞系),其功能異常(如增殖異常、蛋白表達(dá)紊亂、病毒感染應(yīng)答異常、抗菌肽分泌異常)與桿狀病毒擴(kuò)增、重組蛋白高效表達(dá)、昆蟲病害防控等研究密切相關(guān),相關(guān)靶標(biāo)濃度檢測對昆蟲細(xì)胞相關(guān)科研、生物制品研發(fā)及細(xì)胞功能研究具有重要意義。本試劑盒采用高度特異性的雙抗體夾心原理,可快速、精準(zhǔn)檢測這類昆蟲細(xì)胞培養(yǎng)上清液、細(xì)胞裂解液、病毒感染液等相關(guān)樣本中的靶標(biāo)濃度,操作簡便、靈敏度高、特異性強(qiáng),無交叉干擾,適用于科研領(lǐng)域的基礎(chǔ)研究、生物制品生產(chǎn)檢測及相關(guān)機(jī)制探究,為相關(guān)科研及生物制品研發(fā)提供可靠的檢測工具,各組分均經(jīng)過嚴(yán)格質(zhì)量管控,附帶質(zhì)控證書(COA),保障檢測結(jié)果的可靠性。
檢測原理
本試劑盒采用雙抗體夾心酶聯(lián)免疫吸附法(Double Antibody Sandwich ELISA)設(shè)計而成。將特異性抗這類昆蟲細(xì)胞相關(guān)靶標(biāo)單克隆抗體包被于酶標(biāo)板孔內(nèi),形成固相抗體;向板孔中加入待檢測樣本(或校準(zhǔn)品),樣本中存在的相關(guān)靶標(biāo)會與固相抗體特異性結(jié)合,形成抗體-抗原復(fù)合物;洗滌去除未結(jié)合的雜蛋白后,加入酶標(biāo)記的相關(guān)靶標(biāo)特異性二抗,該二抗與抗體-抗原復(fù)合物特異性結(jié)合,形成固相抗體-抗原-酶標(biāo)二抗的三明治復(fù)合物;再次洗滌去除未結(jié)合的酶標(biāo)二抗,加入TMB顯色底物,酶催化底物發(fā)生顯色反應(yīng),顯色強(qiáng)度與樣本中相關(guān)靶標(biāo)的濃度呈正相關(guān);加入終止液終止反應(yīng)后,在450nm波長下測定吸光度(OD值),通過校準(zhǔn)品建立的標(biāo)準(zhǔn)曲線,即可計算出樣本中的具體濃度,檢測范圍可達(dá)到0.156-10ng/mL,靈敏度可達(dá)較低水平,滿足這類昆蟲細(xì)胞相關(guān)常規(guī)科研及生產(chǎn)檢測需求。
產(chǎn)品特點(diǎn)
1. 特異性高:采用高特異性的相關(guān)靶標(biāo)單克隆抗體,可精準(zhǔn)識別樣本中的目標(biāo)靶標(biāo),與其他昆蟲細(xì)胞(如草地貪夜蛾Sf9、Sf21細(xì)胞)相關(guān)蛋白、這類昆蟲細(xì)胞培養(yǎng)體系中雜蛋白及細(xì)胞因子無交叉反應(yīng),有效避免假陽性、假陰性結(jié)果,保障檢測準(zhǔn)確性,符合嚴(yán)格的性能標(biāo)準(zhǔn),適配相關(guān)檢測需求;
2. 靈敏度高:檢測限可達(dá)pg/mL級別,可精準(zhǔn)檢測樣本中低濃度的相關(guān)靶標(biāo),滿足這類昆蟲細(xì)胞早期功能異常、低水平重組蛋白表達(dá)、病毒感染初期等低表達(dá)場景的實驗需求,適配這類昆蟲細(xì)胞功能異常初期的微量靶標(biāo)檢測,助力相關(guān)科研及生產(chǎn)早期探究;
3. 操作簡便:試劑盒包含所有檢測所需試劑(包被板、校準(zhǔn)品、酶結(jié)合物、底物、終止液、洗滌液等),無需額外配制核心試劑,步驟清晰,全程可在2-3小時內(nèi)完成,適配常規(guī)實驗室及生物制品生產(chǎn)檢測操作,試劑外觀整潔,緩沖液為透明溶液,無沉淀或絮狀物,適配這類昆蟲細(xì)胞相關(guān)樣本檢測需求;
4. 重復(fù)性好:嚴(yán)格的生產(chǎn)質(zhì)量控制體系,確保不同批次、同批次內(nèi)試劑盒的檢測結(jié)果一致性,變異系數(shù)(CV)低,保障相關(guān)實驗及生產(chǎn)檢測數(shù)據(jù)的可重復(fù)性和穩(wěn)定性,每批次均經(jīng)過嚴(yán)格質(zhì)控驗證,適配這類昆蟲細(xì)胞樣本的批量檢測,助力相關(guān)規(guī)?;蒲屑吧a(chǎn)檢測;
5. 適用范圍廣:可適配這類昆蟲細(xì)胞培養(yǎng)上清液、細(xì)胞裂解液、病毒感染液、重組蛋白表達(dá)液等多種樣本類型,無需復(fù)雜前處理,適配相關(guān)科研、桿狀病毒表達(dá)系統(tǒng)優(yōu)化、重組蛋白生產(chǎn)檢測及抗病du藥
物篩選等檢測場景,可用于這類昆蟲細(xì)胞功能優(yōu)化、蛋白表達(dá)效率評價、病毒感染機(jī)制研究等相關(guān)基礎(chǔ)研究及生產(chǎn)應(yīng)用; 6. 穩(wěn)定性強(qiáng):試劑盒各組分經(jīng)特殊工藝處理,冷藏保存下活性穩(wěn)定,有效期長,開封后可按要求短期保存,降低試劑浪費(fèi),且試劑批間差異小,保障檢測結(jié)果的一致性,符合體外檢測試劑相關(guān)規(guī)范,適配這類昆蟲細(xì)胞長期培養(yǎng)及批量檢測需求。
適用樣本類型
本試劑盒適用于檢測這類昆蟲細(xì)胞相關(guān)生物樣本中相關(guān)靶標(biāo)濃度,結(jié)合這類昆蟲細(xì)胞的培養(yǎng)特性(半貼壁或懸浮培養(yǎng))及桿狀病毒表達(dá)系統(tǒng)相關(guān)實驗需求,具體適用樣本類型包括:這類昆蟲細(xì)胞培養(yǎng)上清液、細(xì)胞裂解液、病毒感染液、重組蛋白表達(dá)液。
備注:(具體樣本處理方法請參考產(chǎn)品說明書),不同樣本類型的處理流程、稀釋比例需嚴(yán)格遵循說明書要求,避免樣本處理不當(dāng)影響檢測結(jié)果;這類昆蟲細(xì)胞培養(yǎng)上清液采集后需及時離心去除細(xì)胞碎片,避免雜質(zhì)干擾,采集時需確保細(xì)胞處于對數(shù)生長期,保障相關(guān)靶標(biāo)分泌量穩(wěn)定;細(xì)胞裂解液、病毒感染液制備需加入對應(yīng)工作濃度的蛋白酶抑制劑,避免靶標(biāo)降解;重組蛋白表達(dá)液采集后需及時離心處理,冷藏保存,盡快檢測,避免反復(fù)凍融導(dǎo)致靶標(biāo)降解。
儲存與注意事項
(一)儲存條件
1. 未開封試劑盒:常規(guī)儲存于2℃~8℃冷藏環(huán)境,避光、密封保存;嚴(yán)禁冷凍,避免低溫導(dǎo)致抗原、抗體變性,影響試劑活性,尤其避免這類昆蟲細(xì)胞相關(guān)檢測試劑失活;
2. 開封后試劑:包被板拆封后,剩余板條需密封保存于2℃~8℃,放入密封袋并加入干燥劑,避免受潮、污染;酶結(jié)合物、顯色底物等開封后需避光冷藏,盡快使用,一般建議1周內(nèi)用完;校準(zhǔn)品復(fù)溶后建議當(dāng)天使用,未用完部分需丟棄,不可再次保存,校準(zhǔn)品凍干粉需用附帶緩沖液溶解,具體操作參考質(zhì)控證書;
3. 儲存環(huán)境:需保持干燥、通風(fēng),濕度控制在40%~60%,避免陽光直射、高溫、潮濕環(huán)境,嚴(yán)禁與腐蝕性、揮發(fā)性試劑混放,防止試劑失活或污染,保障檢測試劑的穩(wěn)定性。
(二)注意事項
1. 試劑盒使用前需提前從冷藏環(huán)境中取出,平衡至室溫(20℃~25℃),平衡時間不少于30分鐘,避免溫度驟變影響試劑活性及檢測結(jié)果,尤其適配這類昆蟲細(xì)胞相關(guān)樣本的檢測穩(wěn)定性;同時需注意與這類昆蟲細(xì)胞培養(yǎng)溫度(26~28℃)做好銜接,避免樣本溫度波動;
2. 所有試劑需嚴(yán)格按照說明書規(guī)定的比例稀釋、使用,不可隨意更改試劑用量或反應(yīng)時間,確保檢測條件一致;稀釋后的試劑需現(xiàn)配現(xiàn)用,避免長時間放置導(dǎo)致活性下降,保障抗體與靶標(biāo)的特異性結(jié)合效率;
3. 實驗所用器具(EP管、吸頭、酶標(biāo)板等)需保持潔凈,一次性器具嚴(yán)禁重復(fù)使用,可重復(fù)使用器具需清洗、滅菌,避免交叉污染;酶標(biāo)板需輕拿輕放,避免板孔破損、劃痕影響檢測,這類昆蟲細(xì)胞樣本檢測所用器具需額外注意無菌處理,防止細(xì)胞污染及病毒交叉感染;
4. 洗滌過程需充分,每步洗滌后需將酶標(biāo)板倒置拍干,避免未結(jié)合的試劑殘留,影響顯色結(jié)果;顯色反應(yīng)需避光進(jìn)行,終止液加入后需立即測定吸光度,避免顯色過度導(dǎo)致結(jié)果偏差;
5. 樣本需新鮮采集、妥善保存,避免反復(fù)凍融,若不能及時檢測,這類昆蟲細(xì)胞培養(yǎng)上清液、細(xì)胞裂解液、病毒感染液需按說明書要求分裝冷凍保存(-80℃),重組蛋白表達(dá)液可分裝冷凍保存(-20℃),檢測前緩慢融化并離心去除沉淀物,避免渾濁樣本用于檢測;
6. 實驗過程中需做好個人防護(hù),避免試劑接觸皮膚、黏膜,若發(fā)生接觸,需立即用大量清水沖洗;TMB顯色底物具有潛在刺激性,操作時需佩戴手套、口罩;同時注意這類昆蟲細(xì)胞、病毒感染液等生物樣本的生物安全防護(hù),避免樣本泄露污染;
7. 試劑盒過期后嚴(yán)禁使用,所有廢棄試劑、樣本需按生物安全規(guī)范妥善處理,不可隨意丟棄;實驗結(jié)束后,所有接觸試劑的器具需清洗、滅菌后處理;本產(chǎn)品僅用于科研及生物制品生產(chǎn)檢測用途,不適用于人體治療及臨床診斷用途。
訂購信息
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以上信息僅供參考,具體請已產(chǎn)品說明書為準(zhǔn)。