人肺癌雜交細胞
人肺癌雜交細胞,是通過細胞融合技術(shù)構(gòu)建的穩(wěn)定雜交瘤樣細胞株,核心特性是兼具人肺癌細胞的腫瘤特異性與骨髓瘤細胞的無限增殖能力,可穩(wěn)定表達肺癌相關(guān)抗原及特異性蛋白,無支原體、細菌、真菌及病毒污染,經(jīng)篩選與克隆化驗證,可長期穩(wěn)定傳代培養(yǎng)。該細胞源自人肺癌組織細胞與小鼠骨髓瘤細胞融合,保留肺癌細胞的病理生理特征,能模擬肺癌細胞的增殖、侵襲、轉(zhuǎn)移及耐藥相關(guān)特性,是肺癌發(fā)病機制研究、抗腫瘤藥物篩選、肺癌相關(guān)抗原檢測、腫瘤免疫研究的核心工具,廣泛應(yīng)用于臨床醫(yī)學、腫瘤學、藥理學等科研領(lǐng)域,為肺癌基礎(chǔ)研究、藥物研發(fā)及臨床診療相關(guān)研究提供標準化、高活性的細胞模型。
細胞特性
該細胞具有明確的腫瘤細胞特性及雜交細胞生長特征,核心特性如下:細胞形態(tài)典型,呈上皮樣或梭形,多數(shù)為貼壁生長,部分亞型為半貼壁/懸浮生長,胞體飽滿、折光性強,增殖旺盛,符合肺癌細胞與雜交細胞的典型形態(tài)特征;細胞特異性表達肺癌相關(guān)標志物(如CK7、TTF-1、EGFR等),經(jīng)免疫熒光、免疫印跡等方法驗證,標志物表達穩(wěn)定,可特異性區(qū)分于正常肺組織細胞及其他腫瘤細胞;細胞純度≥95%,無雜細胞污染,無支原體、細菌、真菌及病毒污染,細胞活性≥90%,可穩(wěn)定傳代≥50代,傳代過程中腫瘤特性、增殖能力及標志物表達無明顯衰退;細胞增殖速度快,倍增時間短,培養(yǎng)過程中無需額外誘導(dǎo)即可維持腫瘤細胞表型,可穩(wěn)定分泌肺癌相關(guān)蛋白及細胞因子;細胞為貼壁或半貼壁/懸浮依賴性生長,適配常規(guī)腫瘤細胞培養(yǎng)體系,無需特殊包被基質(zhì),培養(yǎng)過程中可穩(wěn)定維持細胞表型與腫瘤相關(guān)功能,符合雜交細胞的核心生長特性。
產(chǎn)品特點
本產(chǎn)品具有活性高、純度高、特異性強、穩(wěn)定性好、適用性廣、操作便捷等核心特點。細胞經(jīng)嚴格酶解融合、密度梯度純化及多指標質(zhì)檢,純度≥95%,活性≥90%,細胞形態(tài)完整、增殖能力強,可直接用于實驗,無需額外純化或誘導(dǎo),降低實驗門檻;細胞特異性ji強,精準表達肺癌相關(guān)標志物,保留肺癌細胞的病理生理特征,可有效模擬肺癌體內(nèi)生長狀態(tài),保障實驗的特異性與準確性,契合肺癌相關(guān)研究的核心需求;細胞生理功能穩(wěn)定,可長期傳代培養(yǎng),腫瘤特性、增殖能力及標志物表達保持穩(wěn)定,能穩(wěn)定提供高活性腫瘤細胞模型,保障實驗數(shù)據(jù)的重復(fù)性與可靠性;適配常規(guī)腫瘤細胞培養(yǎng)體系,培養(yǎng)條件溫和,操作流程簡潔,無需復(fù)雜實驗設(shè)備,適配各類生物實驗室及腫瘤研究機構(gòu)使用;細胞無支原體、細菌、真菌污染,質(zhì)檢嚴格,可直接用于后續(xù)腫瘤機制研究、藥物篩選、抗原檢測等各類實驗,減少實驗污染風險,保障實驗順利進行;適用范圍覆蓋腫瘤學、藥理學、免疫學、臨床醫(yī)學等多個領(lǐng)域,可滿足肺癌發(fā)病機制、腫瘤侵襲轉(zhuǎn)移、耐藥機制、抗腫瘤藥物篩選及療效評價等多種科研場景需求,同時可用于與免疫細胞共培養(yǎng),評估腫瘤免疫應(yīng)答及免yi治療效果,契合腫瘤研究的多元化需求。
適用范圍與樣本(細胞)處理
本產(chǎn)品適用于人肺癌發(fā)病機制研究、抗腫瘤藥物篩選及療效評價、肺癌相關(guān)標志物檢測、腫瘤侵襲轉(zhuǎn)移及耐藥機制研究、腫瘤免疫研究等場景;可用于大規(guī)模培養(yǎng)獲取細胞及細胞上清,用于肺癌相關(guān)蛋白、細胞因子的檢測與純化;可用于免疫熒光、免疫印跡、ELISA、Transwell、劃痕實驗等多種實驗技術(shù),檢測肺癌標志物表達、評估細胞侵襲轉(zhuǎn)移能力、篩選抗腫瘤藥物;可用于體外構(gòu)建肺癌細胞模型,探究肺癌發(fā)生、發(fā)展及耐藥的分子機制,為肺癌臨床診療提供理論支撐;可作為工具細胞,用于抗腫瘤藥物的篩選、藥效評價、作用機制分析,輔助藥物研發(fā)與質(zhì)量控制,符合腫瘤藥物研發(fā)的規(guī)范要求。(具體培養(yǎng)步驟、細胞維護、實驗應(yīng)用細節(jié)請參考產(chǎn)品說明書)
細胞處理與培養(yǎng)需嚴格遵循無菌操作規(guī)范,避免細胞污染;收到細胞后,立即置于37℃水浴鍋中快速解凍(1-2分鐘,嚴禁反復(fù)凍融),解凍后立即加入預(yù)熱至37℃的培養(yǎng)基(腫瘤細胞專用基礎(chǔ)培養(yǎng)基 + 10% 胎牛血清 + 專用生長添加劑)中,輕輕吹打混勻(動作輕柔,避免損傷細胞),4℃、300×g 離心5分鐘,棄上清液,用培養(yǎng)基重懸細胞后,接種至培養(yǎng)瓶中,置于37℃、5% CO?、飽和濕度培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng);培養(yǎng)24小時后更換新鮮培養(yǎng)基,去除未貼壁的死細胞及細胞碎片,后續(xù)每2-3天更換一次培養(yǎng)液;細胞密度達到0.8–1.0×10? cells/mL時進行傳代,傳代比例為1:2–1:4,傳代時輕輕吹打瓶底使貼壁細胞脫落,離心后重懸接種,傳代過程中可采用溫和的細胞分離方式,避免損傷細胞;該細胞可長期傳代培養(yǎng),傳代過程中需維持對數(shù)生長期,確保腫瘤特性及增殖能力穩(wěn)定;如需收集細胞或上清,可在細胞狀態(tài)良好時,用PBS漂洗后處理或直接收集培養(yǎng)上清,適配各類實驗需求。
儲存與注意事項
儲存條件
細胞凍存液(含10% DMSO、20% 胎牛血清及70% 腫瘤細胞專用基礎(chǔ)培養(yǎng)基)需采用程序化降溫方式,置于-80℃密封保存,長期儲存(超過6個月)建議轉(zhuǎn)移至液氮(-196℃)中保存,嚴禁反復(fù)凍融、劇烈震蕩,防止細胞破裂、活性喪失及腫瘤特性下降;凍存細胞取出后需快速解凍,避免在-20℃~0℃區(qū)間停留過久,防止細胞損傷;未接種的凍存細胞需密封保存,做好標記(細胞名稱、凍存日期、批次),避免混淆;培養(yǎng)基需置于2~8℃避光密封保存,避免反復(fù)凍融,使用前預(yù)熱至37℃,未用完的培養(yǎng)液需密封存放,建議1周內(nèi)用完;培養(yǎng)相關(guān)試劑(DMSO、Protein G/A層析介質(zhì)、包被試劑等)需按對應(yīng)要求儲存,確保試劑活性,實驗相關(guān)試劑需按需冷藏或冷凍保存,符合生物制品儲存的規(guī)范要求。
注意事項
1. 所有細胞操作需嚴格遵循無菌規(guī)范,實驗器具需提前高壓滅菌處理,接種、換液、傳代時更換吸嘴,避免交叉污染,影響細胞活性及腫瘤特性;細胞培養(yǎng)過程中需保持培養(yǎng)環(huán)境穩(wěn)定,避免溫度、CO?濃度波動,防止細胞脫壁或活性下降,同時避免劇烈震蕩,防止細胞損傷,契合細胞培養(yǎng)的無菌操作與環(huán)境控制要求。
2. 細胞解凍、接種、傳代需嚴格遵循操作規(guī)范,避免反復(fù)凍融,否則會導(dǎo)致細胞破裂、活性喪失,影響培養(yǎng)效果及腫瘤特性;解凍時需快速均勻,接種后及時置于培養(yǎng)箱中,避免細胞長時間暴露在室溫下;操作過程中動作輕柔,避免吹打過度,防止損傷細胞,影響增殖及腫瘤相關(guān)功能,保障細胞活性與腫瘤特性穩(wěn)定。
3. 細胞培養(yǎng)過程中需定期觀察細胞狀態(tài),若出現(xiàn)細胞貼壁不良、脫壁、形態(tài)異常(胞體皺縮、折光性差)或污染(培養(yǎng)液渾濁、出現(xiàn)絮狀物)等情況,需及時處理;培養(yǎng)基需定期更換,避免營養(yǎng)耗盡及代謝廢物積累,同時可根據(jù)細胞生長狀態(tài)調(diào)整傳代比例,確保細胞處于對數(shù)生長期,維持腫瘤特性穩(wěn)定,契合腫瘤細胞的培養(yǎng)維護要點。
4. 實驗操作需嚴格遵循實驗室安全規(guī)范,妥善處理廢棄細胞、培養(yǎng)液及耗材,操作含DMSO的凍存液時需做好個人防護措施(佩戴手套、口罩、護目鏡),避免皮膚接觸和吸入;避免細胞接觸強氧化劑、重金屬離子及蛋白變性物質(zhì),防止干擾細胞活性及腫瘤特性;培養(yǎng)期間可采用無菌檢測手段定期監(jiān)測細胞無菌狀態(tài),確保細胞質(zhì)量符合實驗及應(yīng)用要求,契合生物實驗室安全與質(zhì)量控制規(guī)范。
訂購信息
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以上信息僅供參考,具體請已產(chǎn)品說明書為準。