抗人VEGF鼠源單克隆抗體雜交瘤細胞
抗人VEGF鼠源單克隆抗體雜交瘤細胞,是通過細胞融合技術(shù)構(gòu)建的穩(wěn)定細胞株,核心功能是持續(xù)分泌特異性識別**人血管內(nèi)皮生長因子(VEGF)** 的鼠源單克隆抗體。該細胞由經(jīng)人VEGF抗原免疫的小鼠B淋巴細胞,與小鼠骨髓瘤細胞(如SP2/0、NS0)融合形成,兼具B淋巴細胞分泌特異性抗體的功能與骨髓瘤細胞無限增殖的特性,經(jīng)HAT培養(yǎng)基篩選、有限稀釋克隆化驗證,確保單克隆源性,無支原體、細菌、真菌及病毒污染,可長期穩(wěn)定傳代培養(yǎng)。其分泌的抗體可特異性結(jié)合VEGF不同活性亞型(如VEGF121、VEGF165),在血管生成、腫瘤、炎癥、心血管疾病等研究領(lǐng)域作為核心工具,適用于ELISA、Western Blot(WB)、免疫組化(IHC)、免疫熒光(IF)、免疫沉淀(IP)等多種免疫檢測,也可用于抗VEGF抗體藥物研發(fā)、藥效評價及作用機制研究,為相關(guān)科研及應(yīng)用提供標準化、高活性的細胞模型。
細胞特性
該細胞具有明確的細胞特異性及抗體分泌特性,核心特性如下:細胞形態(tài)典型,呈淋巴母細胞樣,多數(shù)為半貼壁/懸浮生長,胞體飽滿、折光性強,增殖旺盛,符合雜交瘤細胞的典型形態(tài)特征;細胞特異性表達鼠源抗人VEGF單克隆抗體,抗體亞型以小鼠IgG1/κ為主,部分批次為IgG2a/κ,可特異性結(jié)合人VEGF,與其他物種VEGF(如大鼠、小鼠)交叉反應(yīng)極低,結(jié)合親和力(KD值)符合科研及應(yīng)用需求;細胞純度≥95%,無雜細胞污染,無支原體、細菌、真菌及病毒污染,細胞活性≥90%,可穩(wěn)定傳代≥50代,傳代過程中抗體分泌能力、特異性及生長狀態(tài)無明顯衰退;細胞培養(yǎng)上清中抗體濃度可達1–10 μg/mL,批次間一致性良好,經(jīng)ELISA、WB等方法驗證,抗體活性穩(wěn)定,無非特異性結(jié)合;細胞為半貼壁/懸浮依賴性生長,適配常規(guī)雜交瘤細胞培養(yǎng)體系,無需特殊包被基質(zhì),培養(yǎng)過程中可穩(wěn)定維持抗體分泌功能。
產(chǎn)品特點
本產(chǎn)品具有活性高、純度高、特異性強、穩(wěn)定性好、適用性廣、操作便捷等核心特點。細胞經(jīng)嚴格分離純化及多指標質(zhì)檢,純度≥95%,活性≥90%,細胞形態(tài)完整、增殖能力強,可直接用于實驗,無需額外純化或誘導(dǎo),降低實驗門檻;細胞特異性強,精準分泌抗人VEGF單克隆抗體,結(jié)合特異性高、交叉反應(yīng)低,可有效區(qū)分人VEGF與其他物種同源蛋白,保障實驗的特異性與準確性;細胞生理功能穩(wěn)定,可長期傳代培養(yǎng),抗體分泌能力及結(jié)合活性保持穩(wěn)定,能穩(wěn)定提供高活性抗體,保障實驗數(shù)據(jù)的重復(fù)性與可靠性;適配常規(guī)雜交瘤細胞培養(yǎng)體系,培養(yǎng)條件溫和,操作流程簡潔,無需復(fù)雜實驗設(shè)備,適配各類生物實驗室使用;細胞無支原體、細菌、真菌污染,質(zhì)檢嚴格,可直接用于后續(xù)抗體生產(chǎn)、免疫檢測、藥物篩選等各類實驗,減少實驗污染風(fēng)險,保障實驗順利進行;適用范圍覆蓋免疫學(xué)、腫瘤學(xué)、藥理學(xué)、臨床醫(yī)學(xué)等多個領(lǐng)域,可滿足抗體制備、免疫檢測、機制研究、藥物研發(fā)等多種科研場景需求,同時可用于與血管內(nèi)皮細胞共培養(yǎng),評估抗體中和VEGF的生物學(xué)活性。
適用范圍與樣本(細胞)處理
本產(chǎn)品適用于抗人VEGF單克隆抗體制備、免疫檢測應(yīng)用、血管生成與疾病研究、抗體藥物研發(fā)等場景;可用于大規(guī)模培養(yǎng)生產(chǎn)高純度抗人VEGF單克隆抗體,用于科研試劑、診斷試劑或藥物開發(fā);可用于ELISA、WB、IHC、IF、IP等多種免疫檢測,定量或定位檢測樣本中VEGF的表達;可用于體外/體內(nèi)評估VEGF活性、抗體中和能力,探究VEGF在腫瘤血管生成、炎癥中的作用及抗體干預(yù)效果;可作為對照抗體或工具抗體,用于抗VEGF藥物的篩選、藥效評價、結(jié)合活性及中和能力分析,輔助藥物研發(fā)與質(zhì)量控制。(具體培養(yǎng)步驟、細胞維護、抗體收獲及實驗應(yīng)用細節(jié)請參考產(chǎn)品說明書)
細胞處理與培養(yǎng)需嚴格遵循無菌操作規(guī)范,避免細胞污染;收到細胞后,立即置于37℃水浴鍋中快速解凍(1-2分鐘,避免反復(fù)凍融),解凍后立即加入預(yù)熱至37℃的wan全培養(yǎng)基(RPMI-1640+10%胎牛血清+1%青mei素-鏈mei素)中,輕輕吹打混勻(動作輕柔,避免損傷細胞),4℃、300×g離心5分鐘,棄上清液,用wan全培養(yǎng)基重懸細胞后,接種至培養(yǎng)瓶中,置于37℃、5% CO?、飽和濕度培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng);培養(yǎng)24小時后更換新鮮wan全培養(yǎng)基,去除未貼壁的死細胞及細胞碎片,后續(xù)每2-3天更換一次培養(yǎng)液;細胞密度達到0.8–1.0×10? cells/mL時進行傳代,傳代比例為1:2–1:4,傳代時輕輕吹打瓶底使半貼壁細胞脫落,離心后重懸接種;該細胞可長期傳代培養(yǎng),傳代過程中需維持對數(shù)生長期,確??贵w分泌穩(wěn)定;收獲抗體時,可更換無血清培養(yǎng)基培養(yǎng)24–48小時,收集上清后經(jīng)Protein G/A親和層析純化,獲得高純度抗體。
儲存與注意事項
儲存條件
細胞凍存液(含10% DMSO、20%胎牛血清及70%基礎(chǔ)培養(yǎng)基)需采用程序化降溫方式,置于-80℃密封保存,長期儲存(超過6個月)建議轉(zhuǎn)移至液氮(-196℃)中保存,嚴禁反復(fù)凍融、劇烈震蕩,防止細胞破裂、活性喪失及抗體分泌能力下降;凍存細胞取出后需快速解凍,避免在-20℃~0℃區(qū)間停留過久,防止細胞損傷;未接種的凍存細胞需密封保存,做好標記(細胞名稱、凍存日期、批次),避免混淆;wan全培養(yǎng)基需置于2~8℃避光密封保存,避免反復(fù)凍融,使用前預(yù)熱至37℃,未用完的培養(yǎng)液需密封存放,建議1周內(nèi)用完;培養(yǎng)相關(guān)試劑(青mei素-鏈mei素、DMSO、Protein G/A層析介質(zhì)等)需按對應(yīng)要求儲存,確保試劑活性,其中神經(jīng)營養(yǎng)因子無需添加,抗體純化相關(guān)試劑需按需冷藏或冷凍保存。
注意事項
1. 所有細胞操作需嚴格遵循無菌規(guī)范,實驗器具需提前高壓滅菌處理,接種、換液、傳代時更換吸嘴,避免交叉污染,影響細胞活性及抗體分泌;細胞培養(yǎng)過程中需保持培養(yǎng)環(huán)境穩(wěn)定,避免溫度、CO?濃度波動,防止細胞脫壁或活性下降,同時避免劇烈震蕩,防止細胞損傷。
2. 細胞解凍、接種、傳代需嚴格遵循操作規(guī)范,避免反復(fù)凍融,否則會導(dǎo)致細胞破裂、活性喪失,影響培養(yǎng)效果及抗體分泌;解凍時需快速均勻,接種后及時置于培養(yǎng)箱中,避免細胞長時間暴露在室溫下;操作過程中動作輕柔,避免吹打過度,防止損傷細胞,影響增殖及抗體分泌能力。
3. 細胞培養(yǎng)過程中需定期觀察細胞狀態(tài),若出現(xiàn)細胞貼壁不良、脫壁、形態(tài)異常(胞體皺縮、折光性差)或污染(培養(yǎng)液渾濁、出現(xiàn)絮狀物)等情況,需及時處理;wan全培養(yǎng)基需定期更換,避免營養(yǎng)耗盡及代謝廢物積累,同時可根據(jù)細胞生長狀態(tài)調(diào)整傳代比例,確保細胞處于對數(shù)生長期,維持抗體分泌穩(wěn)定。
4. 實驗操作需嚴格遵循實驗室安全規(guī)范,妥善處理廢棄細胞、培養(yǎng)液及耗材,操作含DMSO的凍存液時需做好個人防護措施(佩戴手套、口罩),避免皮膚接觸和吸入;避免細胞接觸強氧化劑、重金屬離子及抗體變性物質(zhì),防止干擾細胞活性及抗體結(jié)合能力;細胞培養(yǎng)期間可添加1%青mei素-鏈mei素抑制細菌污染,無需避免使用抗生素,如需調(diào)整濃度,需在說明書指導(dǎo)下進行。
訂購信息
如果您對上述產(chǎn)品感興趣,可通過“聯(lián)系我們"頁面提交需求,我們將及時回復(fù)。
以上信息僅供參考,具體請已產(chǎn)品說明書為準。